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吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化檢測試劑盒

型 號

產品時間2023-11-06

所屬分類氨基酸代謝系列

報價550

產品描述:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化檢測試劑盒是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中代謝因其初始底物不同,分為( Glu) 和( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以為前體合成途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。

產品概述

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產品名稱:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化檢測試劑盒

規格:100/48 50/24 

貨號 : EY-01S1114

測試方法:微量法 可見分光光度法  

分類:氨基酸代謝系列

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測定意義:                         

是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中代謝因其初始底物不同,分為( Glu) ( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以為前體合成途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。

測定原理:

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C過程中分解ATP生成ADP和無機磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內產生無機磷的量可確定P5CS活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

 



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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現配現用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

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1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。

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(1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質量計算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細胞數量計算

活性單位定義:25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細胞數量

(4)按液體體積計算

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